Microbiología Clínica

Práctica 5: Tinción vital Objetivo -Observar los microorganismos que hay presentes en nuestro cultivo, utilizando para ello, el colorante rojo metilo. Fundamento -Esta práctica se basa en teñir con Rojo metilo, una muestra que tomemos de nuestro caldo de cultivo que contiene el hisopo con la recogida de saliva que explicamos en la práctica anterior. Para ello vamos a utilizar la proporción 1/10000. Partiendo de una cantidad de 10 microlitros, que equivale a 0.01ml, de colorante, y 99.99 ml de agua. Hacemos esta dilución para no dañar a las células. Material -Mechero Bunsen -Caldo de cultivo con la muestra -Asa de siembra -Colorante -Portas y cubres -Matraz aforado (100ml) -Agua destilada -Pipeta pasteur Procedimiento 1. Preparar el banco de trabajo. 2. Prepara la dilución de colorante en la proporción indicada, en el matraz aforado y homogeneizar. 3. Encender el mechero Bunsen para crear un ambiente estéril, y procedemos a coger con el...

Práctica 4:Medio de cultivo líquido con saliva Objetivo -El objetivo de esta práctica es cultivar una muestra de saliva, para ver el crecimiento de bacterias, hongos y cualquier microorganismo presente en la muestra. Fundamento -Se basa en la multiplicación de microorganismos, como bacterias y hongos, que puedan estar presentes en el material orgánico obtenido de una persona, mediante la siembra de esa muestra en un caldo de cultivo, para así poder estudiar e identificar el tipo de microorganismo que puede estar causando la enfermedad. Material -Hisopo -Tubo para caldo de cultivo -Mechero bunsen -Muestra de saliva -Caldo de cultivo -Gradilla y papel de filtro Procedimiento 1. Preparar el banco de trabajo con todo el material 2. Colocar el tubo que contiene el medio de cultivo líquido (ya preparado) en la gradilla que vamos a usar. 3. Encender el mechero bunsen, para crear un ambiente estéril. Tras esto, ya podemos coger el hisopo (estéril) y...

Práctica 3: Técnica de la gota pendiente Fundamento -Consiste en depositar una muestra de agua estancada  en el centro de un cubre, con una gota de suero fisiológico, y añadiendo una gota de aceito de inmersión, para poder observar los microorganismo al microscopio óptico. Es una técnica de observación en fresco, pero más sofisticada ya que que el aceite de inmersión retrasa la evaporación de la muestra. Material -Portas y cubre -Muestra de agua estancada -Microscopio -Aceite de inmersión Procedimiento 1.Preparar el material. 2. Colocar el mechero bunsen y encenderlo para crear un ambiente estéril. 3. Colocar una gota de la muestra en el centro del cubre y sendas gotas d aceite de inmersión en los bordes de éste. 4.Colocar el cubre de manera invertida sobre un portaobjetos especial, que contiene una excavación central (excavado), para que la gota quede pendiente del cubreobjetos, sin llegar a tocar el porta. 5.Observar al microsco...

PRÁCTICA 2: Observación en fresco Objetivo -Es una técnica muy rápida que permite visualizar microorganismo vivos sin usar colorantes. En la práctica se restringe al estudio de cultivos en medio líquido para observar si existe movimiento de bacterias. Fundamento -Consiste en colocar una gota del medio de cultivo crecido, entre porta y cubre, y visualizarlo al microscopio. En nuestro caso hemos utilizado agua de un charco y agua del río segura, para estudiar los microorganismo existentes en cada una de ellas. Material -Cultivos -Porta y cubre -Microscopio Procedimiento 1.Se deposita una gota de cada tipo de agua en un porta, previamente limpio. Siempre usando el mechero Bunsen para crear un ambiente estéril. 2. Se coloca el cubre encima del porta, con cuidado de que la muestra depositada quede justo entre el porta y el cubre. 3.Observación al microscopio. Esta observación debe hacerse rápidamente para evitar la evaporación de la muestra. ...

PRÁCTICA 1: Preparación de un medio de cultivo F undamento - Un medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de microorganismos. Su composición dependerá de la especie que se quiera cultivar. Objetivo -El objetivo de nuestra práctica consiste en preparar un medio de cultivo utilizando Agar nutritivo como fuente y soporte para el desarrollo de microorganismos en placas de Petri y tubos. Materiales -Papel de filtro         -Agua -Probeta                  -Microondas -Placas Petri            -Piseta -Mechero bunsen     -Balanza -Agar nutritivo           -Frasco Cálculos Tenemos que preparar 300ml de Agar en placas de Petri, para ello calculamos cuántos gramos de Agar nec...