Práctica 5. Tinción vital

Práctica 5: Tinción vital

Objetivo

-Observar los microorganismos que hay presentes en nuestro cultivo, utilizando para ello, el colorante rojo metilo.

Fundamento

-Esta práctica se basa en teñir con Rojo metilo, una muestra que tomemos de nuestro caldo de cultivo que contiene el hisopo con la recogida de saliva que explicamos en la práctica anterior. Para ello vamos a utilizar la proporción 1/10000. Partiendo de una cantidad de 10 microlitros, que equivale a 0.01ml, de colorante, y 99.99 ml de agua. Hacemos esta dilución para no dañar a las células.

Material

-Mechero Bunsen

-Caldo de cultivo con la muestra

-Asa de siembra

-Colorante

-Portas y cubres

-Matraz aforado (100ml)

-Agua destilada

-Pipeta pasteur

Procedimiento

1. Preparar el banco de trabajo.

2. Prepara la dilución de colorante en la proporción indicada, en el matraz aforado y homogeneizar.

3. Encender el mechero Bunsen para crear un ambiente estéril, y procedemos a coger con el asa de siembra, una muestra del tubo de cultivo (abundante muestra). Es necesario esterilizar el asa de siembra antes de usarlo y dejar que se enfríe antes de coger la muestra.

4. Depositar la muestra en el porta y posteriormente con ayuda de una pipeta pasteur, depositar una muestra de colorante en el mismo porta.

5. Homogeneizamos con el asa de siembra y se coloca un cubre encima de la mezcla.

6. Observar al miscroscopio

Medidas de seguridad

-Tras la observación al microscopio, debemos meter los portas en lejía ya que las bacterias que pueda contener están aún vivas.