Práctica 1. Preparación de un medio de cultivo
PRÁCTICA 1: Preparación de un medio de cultivo
Fundamento
-Un medio de cultivo constituye el aporte de
nutrientes indispensables para el crecimiento de microorganismos. Su
composición dependerá de la especie que se quiera cultivar.
Objetivo
-El objetivo de nuestra práctica consiste en preparar un
medio de cultivo utilizando Agar nutritivo como fuente y soporte para el
desarrollo de microorganismos en placas de Petri y tubos.
Materiales
-Papel de filtro
-Agua
-Probeta
-Microondas
-Placas Petri
-Piseta
-Mechero bunsen
-Balanza
-Agar nutritivo
-Frasco
Cálculos
Tenemos que preparar 300ml de Agar en placas de Petri, para
ello calculamos cuántos gramos de Agar necesitamos, con la siguiente regla de
tres:
23gr
---->1000ml
Xgr---->300ml X=6'9gr
Procedimiento
1.Echar en un frasco la cantidad de Agar necesario con el
volumen de agua correspondiente.
3.Dejarlo enfriar a tª ambiente unos 2 o 3 minutos y llevar
al autoclave para esterilizar. Mientras está en el autoclave unos 15-20
minutos, podremos rotular mientras las placas que vamos a usar e ir preparando
el mechero Bunsen.
4.Una vez transcurrido el tiempo, se saca del autoclave y
se deja enfriar a tª ambiente, con cuidado de que no solidifique. Tras esto,
con ayuda del mechero, para crear un ambiente ‘estéril’, se va depositando el
medio de cultivo en las placas de Petri correspondientes. También se puede
utilizar una cabina de flujo laminar, para trabajar más cómodos y en un ambiente
mucho más estéril.
5.Una vez que se solidifique el medio de cultivo, colocar
las placas en posición hacia abajo para que el vapor vaya hacia abajo.
Como se muestra en la imagen sería la posición de las placas hasta que llegue a solidificar el medio.
Como se muestra en la imagen sería la posición de las placas hasta que llegue a solidificar el medio.
Uso del autoclave
-Echar agua hasta cubrir la resistencia que contiene en la
parte de abajo.
-Coger el cestillo y meter los frascos y tubos que contiene
el medio a esterilizar
-Se tapa el autoclave y se le da al botón verde,
anteriormente se debe haber seleccionado el programa de control químico con la
tª y el tiempo adecuados (121ºC y 20min). Contiene dos válvulas, una de drenaje
y otra de vapor.
-La de drenaje debe estar cerrada , y la de vapor
abierta. La de vapor se debe cerrar cuando alcance los 100º y vaya disminuyendo
Medidas de seguridad
-Se debe llevar siempre guantes y bata.
-Cuando se trabaje con el mechero debemos ser muy
cuidadosos para que no haya ningún percance.
-Se debe tener siempre ordenado el banco de trabajo, pues
es importante trabajar cómodos y con los materiales que usemos siempre en el
lado que más convenga.
-Cuando trabajemos con el autoclave y con altas
temperaturas es importante utilizar los guantes ignífugos para no sufrir
quemaduras.
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