Práctica 11. Tinción de Wirtz-Conklin

Práctica 11: Tinción de Wirtz-Conklin

Objetivo

-El objetivo de esta práctica se basa en realizar la tinción de Wirtz-Conklin para visualizar endoesporas.

Fundamento

-Las esporas son formas de resistencia que se forman en el interior del citoplasma de algunas bacterias, fundamentalmente de Bacillus y Costridium.

La pared de las esporas es bastante impermeable por lo que cuesta trabajo teñirlas (se refuerza la coloración gracias a un mordiente), pero una vez teñidas, tras la decoloración perderá el color toda la bacteria excepto las esporas.

Material

 -Guantes

-Verde malaquita 5%

-Torunda

-Alcohol

-Safranina al 0.5%

-Mechero bunsen

-Portas

-Asa de siembra

-Piseta

Procedimiento

1.Preparar el banco de trabajo

2. Preparar cuatro extensiones ( bacteria 5 y 11, espora 1, espora 2) fijadas por calor.

3.Cubrir las preparaciones con verde malaquita al 5%, colocando los portas en una rejilla

4.Calentad los portas con una torunda con alcohol por debajo durante 5 minutos. Dejadlo enfriar

5.Lavad con agua el exceso de coloración

6.Cubrir la extensión con una solución de safranina al 0.5% ( ya viene preparada en esa concentración)

7.Lavad con abundante agua el exceso de colorante y dejar secar la preparación

8.Observar al microscopio óptico

Resultados

-Tras la observación al microscopio, podemos observar que;

1. Bacteria 5; debido a que pertenece a una siembra que se realizó hace un tiempo, todas las esporas están fuera de las bacterias

2. Bacteria 11; se pueden observar bacilos con sus correspondientes endoesporas

3. Espora 1; contiene bacterias con muchas esporas fuera de ellas

4. Espora 2; se pueden observar cadenas de bacilos (en color rosa) y sus correspondientes endoesporas  (en color verde)